一、采樣點的位置及數(shù)量
測定潔凈度的每次最小采樣量；每個潔凈區(qū)最少采樣次數(shù)為3次，當(dāng)潔凈區(qū)僅有一個采樣點時，則在該點至少采樣3次；對預(yù)期空氣潔凈度等級達到4級或更潔凈的環(huán)境采樣量很大可采用ISO14644-1附錄F規(guī)定的順序采樣法。
二、技術(shù)要求
每個采樣點的平均粒子濃度Ci應(yīng)小于或等于潔凈度等級規(guī)定的限值；全部采樣點的平均粒子濃度N的95%置信上限值應(yīng)小于或等于潔凈等級規(guī)定的限值。
三、操作過程及判定
1、儀器開機后預(yù)熱至穩(wěn)定后，方可按照使用說明書的規(guī)定對儀器進行校正，自檢、自校、零計數(shù)。
2、采樣管口置采樣點采樣時在確認計數(shù)穩(wěn)定后方可開始連續(xù)讀數(shù)。
3、計數(shù)器采樣口和儀器的工作位置應(yīng)處在同一氣壓和溫度下，以免產(chǎn)生測量誤差。
4、對于單向流潔凈室采樣口應(yīng)對著氣流方向?qū)τ趤y流潔凈室采樣口宜向上采樣速度均應(yīng)盡可能接近室內(nèi)氣流速度。
5、記錄數(shù)據(jù)評價。
四、潔凈室空氣中懸浮粒子檢測采樣時應(yīng)注意的問題
1、靜態(tài)測試時室內(nèi)的測試人員不得多于2人測試報告中應(yīng)標明測試時所采用的狀態(tài)。
2、對于單向流測試應(yīng)在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運行時間不少于10min后開始非單向流要不少于30min后開始。
3、必須按照儀器的檢定周期定期對儀器作檢定。視儀器本身特點、使用頻率、使用環(huán)境等決定。
4、每個采樣點可按所計算確定的最小采樣量采樣空氣。但一般根據(jù)所使用的粒子計數(shù)器的采樣量及時間設(shè)定通常實際采樣都可能高于最小采樣量。
5、測定時，進入潔凈室的人員要穿潔凈服有風(fēng)淋室要經(jīng)過風(fēng)淋室，在室內(nèi)盡量處于下風(fēng)處并靜止少動。
6、室內(nèi)浮游菌和沉降菌空氣中懸浮微生物的測定有多種，但其測定的基本過程都是經(jīng)過捕集、培養(yǎng)、計數(shù)的過程，目前采用的是浮游菌和沉降菌的測試方法。
6.1、儀器設(shè)備及環(huán)境測量儀器培養(yǎng)皿、離心式微生物采樣器、恒溫培養(yǎng)箱，浮游菌、沉降菌測試前，被測試潔凈室區(qū)的溫濕度須達到規(guī)定的要求，靜壓差必須控制在規(guī)定值內(nèi)，被測試潔凈室區(qū)已消毒。
采樣裝置采樣前的準備及采樣后的處理均應(yīng)在高效過濾器排風(fēng)的負壓實驗室進行操作，測試狀態(tài)有靜態(tài)和動態(tài)兩種并在報告中注明測試狀態(tài)。測試人員測試人員必須穿戴符合環(huán)境潔凈度級別的工作服。?靜態(tài)測試時室內(nèi)測試人員不得多于2個人。
6.2、采樣點的位置及數(shù)量室內(nèi)浮游菌測點和潔凈度測點可相同，采樣必須按所用儀器說明書說明的步驟進行，特別要注意檢測之前對儀器消毒滅菌。沉降菌測定時，培養(yǎng)皿應(yīng)布置在有代表性的地點和氣流擾動極小的地點培養(yǎng)皿數(shù)。
6.4、操作過程及判斷
6.4.1、浮游菌的測試
首先應(yīng)對測試儀器、培養(yǎng)皿表面進行嚴格消毒，采樣器進入被測房間時，先用消毒房間的消毒劑滅菌。用于5級潔凈房間的采樣器宜一直放在潔凈房間。采樣者應(yīng)穿戴潔凈服雙手要消毒。開動真空泵抽氣使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā)時間不少于5min，并調(diào)好流量轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速。關(guān)閉真空泵放入培養(yǎng)皿蓋好蓋子后調(diào)節(jié)采樣器。置采樣口于采樣點后依次開啟采樣器、真空泵、轉(zhuǎn)動定時器、根據(jù)采樣量選定采樣時間。全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于30-35℃恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)時間不少于48h。用肉眼直接計數(shù)，然后用5-10倍放大鏡檢查是否有遺漏，若平板上有兩個或兩個以上的菌落重疊分辨時，仍以兩個或兩個以上菌落計數(shù)。
6.4.2、沉降菌的測試
對單向流如5級凈化房間內(nèi)及層流工作臺測試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行不少于10分鐘后開始；對非單向流如7級、8級以上的凈化房間測試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行不少于30分鐘開始。
采樣方法：將已制備好的培養(yǎng)皿放置在預(yù)先確定的取樣點，打開培養(yǎng)皿蓋使培養(yǎng)基表面暴露0.5小時再將培養(yǎng)皿蓋上蓋后倒置。培養(yǎng)全部采樣結(jié)束，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在30-35℃培養(yǎng)時間不少于48小時。每批培養(yǎng)基應(yīng)有對照試驗檢查培養(yǎng)基本身是否污染可每批選定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。菌落計數(shù)用肉眼直接計數(shù)然后用5-10倍放大鏡檢查有否遺漏。若培養(yǎng)皿上有2個或2個以上菌落重疊可分辨時仍以2個或2個以上的菌落計數(shù)。
五、注意事項
測試用具要做滅菌處理以確保測試的可靠性、正確性。采取一切措施防止人為對樣本的污染。對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細的記錄。由于細菌種類繁多，差別甚大，計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面，仔細觀察不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，并須注意細菌菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時用顯微鏡鑒別。采樣前應(yīng)仔細檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應(yīng)剔除。
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